1. Ukázková složitost :Kapalinová chromatografie je obecně méně účinná pro separaci komplexních vzorků s velkým počtem složek. Je to proto, že čím více složek je ve vzorku přítomno, tím obtížnější je dosáhnout dobré separace a rozlišení.
2. Ukázkové maticové efekty :Matrice vzorku může také interferovat s chromatografickou separací. Pokud například vzorek obsahuje vysoké hladiny solí nebo jiných netěkavých sloučenin, mohou tyto konkurovat analytům o vazbu na stacionární fázi, což vede ke špatné separaci.
3. Přetížení sloupce :Pokud je na kolonu vstřikováno příliš mnoho vzorku, může dojít k přetížení stacionární fáze a špatné separaci. Je to proto, že molekuly vzorku budou soutěžit o vazebná místa na stacionární fázi, což vede k rozšíření píku a snížení rozlišení.
4. Složení mobilní fáze :Složení mobilní fáze může také ovlivnit účinnost kapalinové chromatografie. Například pokud je mobilní fáze příliš polární, může to vést ke špatnému zadržování analytů na stacionární fázi, zatímco pokud je mobilní fáze příliš nepolární, může to vést ke špatné separaci analytů.
5. Teplota :Teplota může také ovlivnit účinnost kapalinové chromatografie. Například pokud je teplota příliš vysoká, může to vést ke zvýšenému rozšíření pásma a snížení rozlišení, zatímco pokud je teplota příliš nízká, může to vést ke špatnému tvaru píku a snížené citlivosti.
6. Nástroje :Kvalita přístrojového vybavení používaného pro kapalinovou chromatografii může také ovlivnit její účinnost. Pokud například čerpadlo není schopno dodávat konzistentní průtok, může to vést ke špatné separaci a snížené reprodukovatelnosti. Podobně, pokud detektor není dostatečně citlivý, nemusí být schopen detekovat nízké hladiny analytů.
Pochopením a řešením těchto potenciálních omezení je možné optimalizovat techniky kapalinové chromatografie pro maximální účinnost.