1. tenká peptidoglykanová vrstva:gramnegativní bakterie, včetně Salmonella, mají ve svých buněčných stěnách relativně tenkou vrstvu peptidoglykanu ve srovnání s grampozitivními bakteriemi. Peptidoglykan je síťový polymer, který přispívá k síle a rigiditě buněčné stěny.
2. vnější membrána:gramnegativní bakterie, včetně Salmonella, mají kromě cytoplazmatické membrány vnější membránu. Vnější membrána je jedinečný rys, který odlišuje gramnegativní bakterie od grampozitivních bakterií.
3. Lipopolysacharid (LPS):Vnější membrána Salmonella obsahuje molekuly lipopolysacharidů (LPS). LPS je komplexní molekula sestávající z lipidů a polysacharidů. Lipidová část LPS, známá jako lipid A, je zodpovědná za endotoxické vlastnosti gramnegativních bakterií.
Gramové barvení zahrnuje následující kroky:
1. krystalické fialové barvení:Všechny bakterie jsou obarveny krystalovým fialovým barvivem, které vstupuje do gram-pozitivních i gramnegativních bakteriálních buněk.
2. roztok jódu Grama:Roztok jódu Grama se přidává jako mordant, který pomáhá stabilizovat komplex křišťálového fialového-jodinového komplexu v bakteriálních buňkách.
3. krok odbarvení:obarvené buňky jsou pak ošetřeny dekolorizačním činidlem acetonem alkoholu. Grampozitivní bakterie si zachovávají komplex křišťálových fialových-jod, zatímco gramnegativní bakterie ztratí barvivo.
4. Safranin Counterstain:Nakonec jsou odbarvené gramnegativní bakterie kontrastně barveny safraninem, který jim propůjčuje růžovou nebo červenou barvu.
Po dokončení těchto kroků se grampozitivní bakterie objevují fialové pod mikroskopem kvůli zadržené krystalové fialové, zatímco gramnegativní bakterie, včetně Salmonella, se díky safraninovému kontrastoji objevují růžové nebo červené.
Celkově je Salmonella gramnegativní díky své tenké peptidoglykanové vrstvě, přítomnosti vnější membrány s lipopolysacharidy (LPS) a jeho negativní reakci na postup barvení gramu, což má za následek růžové nebo červené zbarvení.